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細胞培養液選配關注點


培養液是人工模擬細胞體內生長的生存環境,對于細胞培養起著關鍵性作用。

 

1.   選擇培養基沒有一定的標準,某種培養基可以適合多種細胞,某種細胞也可以在不同培養液中生長。但是,建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞優選的培養基。可以查閱參考文獻,或在購買細胞株時咨詢。

 

2.   1640的確是非常便宜的培養基,也很好用。但是,它的緩沖力*弱,所以有時會對細胞的生長狀態有影響,尤其是一些實驗室長期傳代狀態不好的細胞。有條件還是用DMEM培養基。

 

3.      一旦在新鮮培養基中添加了血清和***時,放入4度冰箱。應該在2到3周內用完它。因為,一些***和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。2-3周后就降解完了。


4.    培養基的pH值隨著碳酸氫鈉量的增加,呈拋物線增長,當碳酸氫鈉加到一定量時,pH變化越來越小。而培養基的滲透壓值隨著碳酸氫鈉量的增加,呈直線增長,碳酸氫鈉量越大,滲培養基變成了高滲溶液,細胞會脫水萎縮滴。     (ATCC 推薦大部分細胞添加碳酸氫鈉為1.5g/L)

 

5.      胎牛 血清必須貯存于–20 ~ -70℃,若存放于4℃,2~3周就降解了。可將1瓶500ml的血清,每次40~45 ml 分裝于無菌50 ml 離心管中。 

 

6.  血清的解凍和細胞的解凍正相反:細胞是越快越好;血清是越慢越好。血清解凍步驟: -20℃或–70℃冰箱拿出來,放到4℃冰箱,放一天,慢慢融化。


7.    進口的胎牛血清,一般不需要熱滅活,因為會造成沉淀物顯著增多,且會影響血清的品質。這些沉淀物在顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常誤以為是血清遭受污染。

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